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属性 |
详细信息 |
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产品名称 |
TJ-AF-568 |
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染料类别 |
磺化罗丹明(Sulfonated Rhodamine) 类染料 |
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分子量 |
NHS酯形式约 791.8 Da;酰肼形式约 730.74 Da |
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外观 |
通常为固体或粉末 |
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光谱相似染料 |
罗丹明红(Rhodamine Red) |
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参数 |
数值 |
备注 |
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最大激发波长 (Ex) |
~578 nm |
部分资料显示为579 nm或577 nm |
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最大发射波长 (Em) |
~603 nm |
发射峰位于橙红区 |
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摩尔消光系数 (ε) |
~88,000 - 91,000 M⁻¹cm⁻¹ |
表明其光吸收能力很强 |
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荧光量子产率 (Φ) |
0.69 |
在PBS缓冲液(pH 7.2)中测得 |
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荧光寿命 (τ) |
3.6 ns |
在水中测得(22°C) |
1、高亮度与高光稳定性:具有高量子产率(0.69)和优异的光稳定性。其偶联物比其他光谱相似荧光染料的偶联物更明亮、光稳定性更强。长时间曝光不易光漂白。
2、优异的水溶性:作为磺化罗丹明衍生物,分子中的磺酸基团使其高度亲水,在水相环境中性能出色。
3、宽的pH稳定性:在pH 4至10的广泛范围内,荧光信号保持稳定。
4、与RFP滤光片组匹配良好:其光谱与红色荧光蛋白(RFP)的滤光片组兼容。
5、高标记效率:可以在蛋白质上实现高摩尔比标记而不发生显著的自淬灭。
TJ-AF-568是生命科学研究的通用工具,应用极为广泛:
1、免疫检测:用于免疫荧光 (IF/ICC)、免疫组化 (IHC) 和流式细胞术 (FACS)。
2、细胞成像:适用于共聚焦显微镜及超分辨率显微镜(如dSTORM、SIM、STED)。
3、细胞示踪与标记:酰肼衍生物可作为细胞示踪剂,通过显微注射等方式载入细胞。
4、核酸研究:用于标记寡核苷酸探针,进行荧光原位杂交 (FISH) 和实时PCR。
5、活细胞成像:良好的光稳定性使其适合长时间的活细胞观察,跟踪细胞动态过程。
6、多重荧光实验:在多重荧光实验中可与绿光染料(如TJ-AF-488)同时使用而无明显信号干扰。
为方便标记不同生物分子,TJ-AF-568被制成多种活性衍生物:
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衍生物类型 |
主要用途 |
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NHS酯 (NHS Ester) |
最常用。用于标记蛋白质、抗体、胺修饰的寡核苷酸等分子中的氨基 |
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马来酰亚胺 (Maleimide) |
特异性标记含半胱氨酸的蛋白质或肽段,生成稳定的硫醚键 |
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酰肼 (Hydrazide) |
标记多糖或糖蛋白中的醛/酮;也可用作细胞示踪剂 |
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羧酸 (Carboxylic Acid) |
用作参比标准品或化学合成前体 |
1、储存条件:作为粉末,应在 -20°C 下避光、干燥保存。
2、运输条件:通常在冰袋条件下运输。
3、标记反应(以NHS酯为例):
(1)溶剂:通常溶于无水DMF或DMSO。
(2)缓冲液:在0.1–0.2 M 碳酸氢钠缓冲液(pH 8.3) 中室温反应1小时。
(3)蛋白浓度:建议蛋白浓度至少为2 mg/mL以获得最佳标记效果。
(4)纯化:标记后的抗体等偶联物可通过凝胶过滤层析(如Sephadex™ G-25)进行纯化。